ABSTRACT
Lutzomyia longipalpis s.l. is the main vector of American visceral leishmaniasis (AVL) and occurs as a species complex. DNA samples from two Brazilian sympatric species that differ in pheromone and courtship song production were used to analyse molecular polymorphisms in an odorant-binding protein ( obp29 ) gene. OBPs are proteins related to olfaction and are involved in activities fundamental to survival, such as foraging, mating and choice of oviposition site. In this study, the marker obp29 was found to be highly polymorphic in Lu. longipalpis s.l. , with no fixed differences observed between the two species. A pairwise fixation index test indicated a moderate level of genetic differentiation between the samples analysed.
Subject(s)
Animals , Insect Vectors/genetics , Psychodidae/genetics , Receptors, Odorant/genetics , Sexual Behavior, Animal/physiology , Sympatry/genetics , Brazil , Genetic Fitness , Pheromones/genetics , Polymorphism, Genetic/genetics , Reproductive Isolation , Sequence Analysis, DNAABSTRACT
O olfato é um dos mais importantes aspectos que modulam o comportamento de insetos. Em insetos hematófagos ele esta diretamente envolvido na procura e escolha do hospedeiro para o repasto sanguíneo, além da procura de parceiros sexuais, escolha de locais para oviposição e reconhecimento de predadores. As antenas são as principais estruturas envolvidas no olfato e nelas são encontradas proteínas que se ligam a dores (OBPs) enzimas que degradam odores (ODEs), proteínas quimiosensorias (CSPs) e os Neurônios Receptores Olfativos (ORNs), que apresentam em sua superfície proteínas Receptoras de Odores (ORs). Todas estas proteínas estão envolvidas no complexo sistema de percepção de odores. Com o objetivo de identificar genes relacionados ao olfato em Lutzomyia longipalpis (Díptera: Psychodidae: Phlebotominae), foram construídas e analisadas duas bibliotecas de cDNA de antenas, uma de machos e outra de fêmeas. L. longipalpis é o principal vetor da Leishmaniose Visceral Americana, doença parasitária e endêmica no Brasil. O estudo de fatores relacionados ao comportamento de insetos vetores vem elucidando aspectos de sua biologia que podem auxiliar no métodos de controle. As seqüências geradas nas suas bibliotecas de cDNA de antenas de L.longipalpis foram analisadas utilizando o sistema Stingray (System for Integrated Genomic Resources and Analysis), onde a qualidade das seqüências foi avaliada e comparações foram feitas com os diversos bancos de dados de proteínas, nucleotídeos e de domínio. Foram gerados 1765 ESTs (Expressed Sequence Tags) de alta qualidade das antenas de machos e 809 ESTs das antenas de fêmeas. A grande maioria dos ESTs foi de seqüências únicas (singlets), demonstrando a grande variabilidade das seqüências. Este fato foi confirmando pelo pequeno número de clusters por classe resultante do Gene Ontology. Foram encontrados 14 ESTs com similaridade a OBPs de Drosophila melanogaster, Aedes aegypti e Anopheles gambiae, que apresentaram seqüências completas. Além destes, foi encontrado um EST, na biblioteca de antenas de machos, que apresentou homologia ao receptor de odor 83b de D. melanogaster. Este receptor é amplamente encontrado entre os insetos e geralmente aparece sendo coexpresso com outro receptor. Por este motivo acredita-se que module a resposta a todos os odores. Sete ESTs apresentaram similaridade a Arrestinas. Estas proteínas potencializam o processo de fosforilação dos receptores pela proteína G e ativam outras proteínas que estão envolvidas no gatilho de internalização do complexo odor-GPCR (proteína G ligada ao receptor) no neurônio. Finalmente, ESTs similares a genes que codificam canais iônicos envolvidos no comportamento de outros insetos também foram encontrados e serão futuramente estudados.